Полимеразын гинжин урвал гэж товчилсонПГУАнгли хэлээр бол ДНХ-ийн тодорхой хэсгүүдийг олшруулахад ашигладаг молекул биологийн арга юм.Үүнийг биеийн гаднах ДНХ-ийн тусгай хуулбар гэж үзэж болох бөгөөд энэ нь маш бага хэмжээний ДНХ-ийг их хэмжээгээр нэмэгдүүлэх боломжтой юм.Бүхэл бүтэн хугацаандПГУУрвалын үйл явцад нэг төрлийн бодис чухал үүрэг гүйцэтгэдэг - фермент.
1. Так ДНХ
Эхний өдрүүдэд туршилтандПГУ, Эрдэмтэд Escherichia coli ДНХ полимераза I-г ашигласан боловч энэ ферментэд нэг асуудал бий: цикл хийх бүрт шинэ ферментийг нөхөх шаардлагатай байдаг бөгөөд энэ нь үйл ажиллагааны үе шатыг бага зэрэг төвөгтэй болгодог бөгөөд бүрэн автоматаар олшроход хэцүү байдаг.Эрдэмтэд 1988 онд Thermus aquaticus-аас Taq ДНХ полимеразыг санамсаргүйгээр тусгаарласны дараа энэ асуудал шийдэгджээ.Түүнээс хойш ДНХ-ийг автоматаар өсгөх нь бодитой болсон.Энэ ферментийн нээлт нь мөн болгодогПГУтехнологи нь тохиромжтой, практик, бүх нийтийн технологи юм.Одоогийн байдлаар Так ДНХ полимераз нь ДНХ-ийн багц дахь хамгийн түгээмэл полимераз юм.
2. PfuDNA
Дээр дурдсанчлан Taq DNase нь том алдаатай тул эрдэмтэд таарахгүйн улмаас өвөрмөц бус олшруулалтаас зайлсхийхийн тулд Taq DNA полимеразыг тодорхой хэмжээгээр өөрчилсөн бөгөөд үр дүнд нь туршилтын үр дүн буруу гарсан.Гэхдээ Так ДНХ полимеразын өөрчлөлт нь тасалгааны температурт ДНХ полимеразын идэвхийг дарангуйлдаг.PfuDNA полимераз нь Так ДНХ полимеразын дээрх сул талуудыг нөхөж, ПГУ-ын урвалыг хэвийн явуулж, зорилтот генийг олшруулах амжилтын түвшинг үр дүнтэй сайжруулж чадна.
3. Урвуу транскриптаза
Урвуу транскриптазыг 1970 онд нээсэн. Энэ фермент нь РНХ-ийг загвар болгон, dNTP-ийг субстрат болгон ашиглаж, суурь хосолсон зарчмыг баримталж, 5′-3′ чиглэлд РНХ-ийн загварт нэмэлт ДНХ-ийн нэг хэлхээг нэгтгэдэг.Урвуу транскриптаза нь үндсэндээ ДНХ эсвэл РНХ загваруудын ДНХ полимеразын идэвхжилээс хамаардаг тул 3′-5′ экзонуклеазын идэвхгүй байдаг.Гэсэн хэдий ч энэ нь RNase H-ийн идэвхжилтэй бөгөөд энэ нь урвуу транскриптазын синтезийн уртыг тодорхой хэмжээгээр хязгаарладаг.Зэрлэг урвуу транскриптазын үнэнч чанар, термостат чанар багатай тул эрдэмтэд үүнийг өөрчилсөн.
Учир ньПГУТуршилтын гол хэрэглэгдэхүүн нь: бие даасан ПГУ-ын хоолой, 4/8 туузан ПГУ-ын хоолой, ПГУ-ын хавтан.
ЛабиогийнхПГУ-ын хэрэглээний материалдараах байдалтай байнадавуу тал:
ПГУ-ын хавтан: Өргөн дулааны мөчлөгийн нийцтэй байдал;Өндөр тодосгогч, худгийг хялбархан таних;худгийн флюресценцийн тусгал;сайндулаан дамжуулагч;Баталгаажсан DNase, RNase, DNA, ПГУ-ын дарангуйлагч, туршилтын пироген агуулаагүй.
ПГУ-ын бие даасан хоолой: Ууршилтанд тэсвэртэй, сайндулаан дамжуулагч;Маш сайн оптик тунгалаг; Баталгаажсан DNase, RNase, DNA, ПГУ-ын дарангуйлагч, туршилтын пироген агуулаагүй.
4/8 судалтай ПГУ-ын хоолой: Хэт нимгэн хана; өндөр тунгалаг; сайн флюресценцийн тусгал;Эмийн үйлдвэр, хүнсний үйлдвэр, молекул биологид ашиглах боломжтой; өндөр чанартай, онгон PP материал; Баталгаажсан DNase, RNase, DNA, ПГУ-ын дарангуйлагч, туршилтын пироген агуулаагүй.
Шуудангийн цаг: 2023-06-09